Rena DNA

labbglas_110I princip är det mycket enkelt att isolera DNA.
  1. Man tar de celler vars arvsmassa man vill isolera, lägger dem i ett provrör och slår sönder dem. Det sker antingen genom ultraljudsbehandling, genom att mala dem, eller genom att hälla i tvålämnen som löser upp cellmembranen.
  2. De krossade cellerna centrifugeras. Då kommer rester av cellmembran, ribosomer och andra tunga saker att hamna i botten av provröret. Vätskan ovanför innehåller DNA, proteiner och RNA.
  3. I denna vätska droppar man ett enzym, som bryter ner RNA-molekylerna.
  4. Därefter häller man på fenol och skakar provröret. Fenol får proteiner att kleta ihop med varandra. När man låter röret stå, sjunker fenolen till botten. De hopkletade proteinerna hamnar som ett vitt ludd i gränsskiktet mellan fenolen och den vattenlösning där DNA-molekylerna simmar omkring. Suger man upp vattnet ovanför fenolen och det vita luddet, har man en lösning med enbart DNA.

Denna procedur tar mellan en halvtimme och sex timmar, beroende på hur rent DNA man vill ha.

Då man renat fram DNA får man fram DNA-molekyler som är ohanterligt stora. En forskare vill därför ofta klippa sitt DNA i mindre bitar. För det ändamålet används en slags målsökande saxar som heter restriktionsenzymer.

PDFSkriv utSkicka sidan