PCR i detalj

Metoden PCR (Polymerase chain reaction) spelar en viktig roll i många genanalyser. Med den kan man skapa ett stort antal kopior av en DNA-bit, även om den bara finns i ett enda exemplar i ett prov. Därigenom kan man analysera mycket små mängder DNA. Till exempel från intorkat saliv på cigarettfimpar eller från miljontals år gamla fossilerade ben.

För att detta ska vara möjligt måste man dock känna till DNA-sekvensen i början och slutet av det DNA som ska kopieras och låta en DNA-syntesmaskin tillverka ett stort antal korta enkelsträngade DNA-bitar med dessa sekvenser. Dessa DNA-bitarna kallas primers.

Steg 1
Dessa primers blandas med det prov som ska anlyseras. Man häller också i lösa DNA-byggstenar och en värmetålig variant av det enzym som kan kopiera DNA.

Steg 2
Temperaturen höjs, så att basparen släpper mellan de två strängarna i det DNA som ska kopieras. DNAt blir enkelsträngat.

Steg 3
Därefter sänks temperaturen till den nivå där DNA-molekylernas baser åter börjar fästa vid varandra. Då kommer primrarna att fastna i början och slutet av de delar av de DNA-molekyler som ska kopieras.

Steg 4
Temperaturen sänks ytterligare och kopieringsproteinerna börjar arbeta. De tar tag i ena änden av de små bitarna och börjar förlänga dem.

Steg 5
Den del av DNA-molekylen som skulle mångfaldigas finns nu i två exemplar.

Steg 6
Processen upprepas och för vart varv fördubblas antalet exemplar av det DNA som skulle kopieras.

Senast uppdaterad: Måndag 23 augusti 2010 15:36